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刻诗工艺筝

一种先进的用于高细胞浓度灌流培养的声学截留系统-BioSep

发布时间：2026-02-09 06:04:56点击量：

　　。与批培养和流加补料技术相比，灌流为细胞提供了有利的环境和较短的产品停留时间。这对于不稳定产品的质量尤为重要。灌流模式的另一个优点是它允许使用较小的生物反应器并减少在位清洗操作

　　·来自生物反应器的细胞悬液被泵输入到安装在生物反应器头板上的声学腔室中。

　　·随着细胞浓度和灌流速率的增加，声学腔室的功率输入被调整到更高水平，以保持高分离效率[5]。

　　·运行时间对应于细胞与清液分离的时间段。在运行时间结束时，声场暂时关闭，收获暂停，同时腔室中的细胞返回生物反应器。

　　·在这项研究中，功率水平和运行时间发生了变化，以获得最佳设置，使高密度CHO细胞培养超过125* 106cells/mL。

　　·为了评估在一系列高细胞浓度下的分离性能，将CHO细胞在摇瓶中培养，浓缩、然后悬浮在使用my-Control操作系统的Applikon 250 mL MiniBio生物反应器中。

　　）实验装置包括：进料罐、废液罐、收获泵、进料泵、声学室、MiniBio 250 mL、my-Control

　　对应于收获管路的活细胞浓度，BX对应于生物反应器中的活细胞浓度[4]。为确保稳定和可重复的声学条件，在从收获管路和生物反应器取样之前，超声波功率输入、收获速率和运行

　　反冲洗定时器设置至少恒定30分钟。根据所选运行周期的持续时间，在时间点采集收获样本，以获得一致且可比较的数据

　　·在高细胞密度的灌流培养过程中，需要高循环速率，这会导致声学室内的湍流增加。

　　·在目前的研究中观察到新的BioSep版本允许声学诱导的细胞聚集体不受干扰地沉降，最大流入速率高达7 mL/min（~10 L/天），允许保留超过100*106cells/mL的生物反应器浓度。

　　·研究了1~15L/天的不同净收获率、2~7 W的功率水平和2至10分钟的运行时间（未显示值），结果总结在图3中。

　　·从图3中可以看出，当CHO细胞总浓度为100*106cells/mL时，可以实现高达3L/天的净收获率，同时保持98%的典型活细胞分离效率。超过4L/天的净收获率会影响最高密度下的效率，但分离仍保留了90%以上的细胞。

　　·在总浓度为125*106cells/mL时，以2L/天的净收获率运行，细胞分离效率达到98%。

　　·在细胞浓度增加或收获率高的情况下，使用高功率水平和更短的运行周期是必要的[5]。

　　·优化功率（w）和运行时间（min）的配对，以实现高密度细胞。这些值的组合使得最高的分离效率是：2 w - 10 min;3 W - 5 min;5 W - 3 min;7 W - 2 min。这些结果是意料之中的，因为更高的功率水平允许在高浓度或高流量条件下增加细胞的保留，而更短的运行时间避免了细胞聚集体在声室中过度积聚，然后才有机会沉降回到生物反应器。